微球菌的核酸酶
D5220-1
描述
| 浓度 | 0.1 U /µl |
|---|---|
| 酶委员会数量 | (提到过3.1.31.1) |
| 酶失活 | 氯化钙的EDTA或EGTA摩尔过剩。 |
| 存储 | 商店在-20°C长达12个月。避免重复冻结/解冻。长时间存储应≤-70°C。 |
| 单位的定义 | 一个单位(U)会产生1.0µmole酸溶性分布从每分钟天然DNA在pH值8.8 37°C,基于EM / 260 = 10000混合核苷酸。 |
Q1:亚特兰蒂斯dsDNase和MNase之间的区别是什么?
•亚特兰蒂斯dsDNase双链DNA特定核酸内切酶,裂解在DNA产量寡核苷酸磷酸二酯键5 '磷酸和3 '羟基末端。增加孵化时间与亚特兰蒂斯dsDNAse将提高效率,创造更多mono-nucleosomal DNA。•微球菌的核酸酶(MNase)是一个单和双链DNA和RNA酶。MNase是单链核酸更具体,但乳沟是偏向at富集和AU-rich序列。MNase将导致亚特兰蒂斯dsDNase相比更健壮的消化。增加孵化时间与MNase将增加这种酶的效率并产生更多mono-nucleosomal DNA。•所需的酶的选择取决于下游应用程序。
Q2:酶的敏感性不同细胞类型?
一旦分离细胞核,酶的敏感性不同细胞类型之间应该类似。然而,一些细胞线会更敏感的洗涤剂核准备缓冲,从而导致核的丧失。你可以稀释细胞核预科1:1的缓冲区MN消化核前缓冲隔离。
第三:有信息的核酸外切酶活性是否MNase消化dsDNA从3‘5’吗?
MNase是一个优先的endo-exonuclease劈开在或AU-rich地区,收益率mono-nucleotides寡核苷酸和三号航站楼的磷酸盐。